석영 커버글라스 — TIRF과 단분자 관찰의 숨은 비결
석영 커버글라스 — TIRF과 단분자 관찰의 숨은 비결
첫 TIRF 실험 때 노이즈가 너무 심해서 데이터를 다 버렸어요. 필터 교체, 레이저 정렬, 암실 차단까지 다 해봤는데 원인은 커버글라스 자체의 자가형광. 석영으로 바꾸니 백그라운드가 70% 감소. 이건 정말 충격이었어요.
두께 공차의 중요성
고NA 대물렌즈(1.3 이상)는 0.17mm 커버글라스에 최적화. 일반 #1.5 공차 ±0.02mm, 석영 ±0.005mm. 0.01mm만 틀어져도 구면수차 발생. 석영이면 골라낼 필요 없이 전부 규격 내.
세척 내구성
석영은 피라냐 용액, 오토클레이브(121°C) 50회 이상 견딤. 일반 유리보다 깨지기 쉬우니 핀셋은 가장자리만. 세포 배양엔 폴리라이신 코팅 필수.
TIRF, STORM, 단분자 이미징: 석영. 일반 공초점: 유리.
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