Coprioggetto in quarzo — il segreto per TIRF e singola molecola

Coprioggetto in quarzo — il segreto per TIRF e singola molecola

La mia prima sessione TIRF è stata un incubo: rumore di fondo altissimo, segnale sepolto. Ho cambiato filtri, allineato il laser, spento le luci del corridoio. Niente. Poi ho sostituito il coprioggetto: da borosilicato a quarzo. Il background è crollato del 70 %. Era l'autofluorescenza del vetro.

Lo spessore è critico

Obiettivi ad alta NA (≥1.3) sono corretti per 0,17 mm esatti. I coprioggetto #1.5 standard hanno tolleranza ±0,02 mm. Il quarzo: ±0,005 mm. 0,01 mm di scarto introduce aberrazione sferica. Col quarzo, ogni coprioggetto è in specifica.

Pulizia senza usura

Il quarzo resiste a soluzione piranha, autoclave (121 °C), 50+ cicli di lavaggio. Attenzione: è più fragile del vetro — usare pinzette fini, afferrare solo dal bordo. Per colture cellulari, coating con poli-L-lisina (il quarzo nudo è idrofobico).

TIRF, STORM, molecola singola: quarzo. Routine: vetro.

Coprioggetto e vetrini MUHWA

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